在Adobe Illustrator中，图层的相减操作通常指的是将两个或多个图层合并为一个图层，以创建一个新的图层。以下是使用快捷键进行图层相减的操作指南：
1. 首先，打开您的AI文件并选择您想要相减的两个或多个图层。
2. 在顶部菜单栏中，点击“窗口”（Window）>“图层”（Layers）来展开图层面板。
3. 在图层面板中，找到您想要相减的图层，然后按住Shift键的同时单击这两个图层，或者按住Alt键的同时单击这两个图层。这将选中这两个图层。
4. 接下来，在顶部菜单栏中，点击“编辑”（Edit）>“剪切”（Clip）或者按下Ctrl+X（Windows）/Cmd+X（Mac）来剪切选中的图层。这将把选中的图层从工作区中移除。
5. 此时，您可以继续添加其他图层，直到所有需要相减的图层都被选中。
6. 一旦所有的图层都被选中，再次在顶部菜单栏中，点击“编辑”（Edit）>“粘贴”（Paste）或者按下Ctrl+V（Windows）/Cmd+V（Mac）来将选中的图层粘贴到当前工作区。这样，所有被剪切的图层将被合并为一个图层。
7. 最后，您可以对新生成的图层进行编辑和调整，以满足您的需求。
注意：在进行图层相减操作时，请确保只选取了您想要相减的图层，以避免意外地删除其他图层。此外，如果您使用的是多个图层，请确保您已经选择了要相减的所有图层。