荧光蛋白的由来
1962年,维多利亚水母GFP首次被发现,在1992年被成功克隆,并在1994年首次作为荧光标记用于体内标记。此后,水母衍生GFP被改造为蓝色荧光蛋白(BFP)、青色荧光蛋白(CFP)和黄色蛋白(YFP)突变体。人们也陆续鉴定了来自其他物种的荧光蛋白,从而将其进一步扩展至橙色,红色和远红外光谱区。
荧光蛋白的由来
荧光蛋白的发光原理
荧光蛋白的发光原理在于其发色基团经一定波长的光照射后被激活,并将能量以光能形式释放,这时我们就能在荧光蛋白激发光源GFPfinder-2101下看到荧光啦!但由于能量不能全以光的形式辐射出来,所以荧光蛋白的发射光(荧光)的波长比激发光长。
下图:常见荧光蛋白的激发和发射波长
常见荧光蛋白的激发和发射波长
常见荧光蛋白
红色荧光蛋白 (RFP)
mCherry具有优异光稳定性,是最通用红色单体(但融合表达时有较弱的齐聚效应)
tdTomato具有mCherry相同的光稳定性,亮度更强,是追踪表达水平的理想选择,但为串联二聚体,可以在融合标签大小不干扰蛋白质功能的情况下使用
mStrawberry是最亮的红色单体,但光稳定性要弱于mCherry
DsRed是细胞毒性最小的RFP
mApple在蛋白的融合表达中是mCherry理想的替代物,但其光稳定性要远弱于mCherry
mKate2从参数方面考量是综合亮度、光稳定性和齐聚性的最佳RFP,但目前报道相对较少
橙色荧光蛋白 (OFP)
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mOrange是最亮的橙色单体
黄色荧光蛋白 (YFP)
YPet具有极高的光稳定性且成熟快,亮度极高
mVenus是亮度极高的黄色单体
绿色荧光蛋白 (GFP)
EGFP是目前适用范围最广的FP,综合多个优势属性
青色荧光蛋白 (CFP)
mTurquoise是最亮的青色单体
CyPet是最稳定的CFP
蓝色荧光蛋白 (BFP)
mTagBFP2是最稳定,成熟极快、亮度极亮的蓝色单体
下图:激发红色荧光蛋白的荧光手电筒GFPfinder-2101GR
荧光蛋白手电筒返回搜狐,查看更多